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利用孢子食用菌装袋机保存菌种系列方法

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利用孢子食用菌装袋机保存菌种系列方法

发布日期:2017-07-05 00:00 来源:http://www.gxjxxpc.com 点击:

食用菌装袋机滤纸片保藏法。取白色(收集深色孢子)或黑色(收集白色孢子)滤纸,剪成4.0cm×0.8cm的小纸条,平铺在培养皿中用纸包裹进行灭菌。采用钩悬法收集孢子,让孢子落在滤纸条上。将载有孢子的滤纸条放入保藏试管中,白胶塞封口,再将保藏试管放入干燥器中1~2d,除去滤纸水分,然后低温保藏。保存期可达2~10年。

沙土管保藏法。取河沙用水浸泡洗涤数次,过60目筛除去粗粒,加用1%稀盐酸煮沸30min,以除去其中的有机质,再用水冲洗至pH值达到中性,烘干备用。同时取非耕作层的瘦黄土或红土,用水反复冲洗至中性,烘干碾细,过100目筛,将处理好的沙与土以2~4∶1混匀,然后分装小试管内,每管装0.5g,高压灭菌(1.5kg/cm2)3次,再干热灭菌(160℃,2h)1次,待无菌检验合格后方可使用。将已形成孢子的斜面菌种,在无菌条件下注入无菌水3mL,刮菌苔,制成菌悬液,再用无菌吸管吸取菌液滴入砂土管中,以浸透砂土为止。将接种后的沙土管放入盛有干燥剂的真空干燥器内,接上真空泵抽气至沙土干燥为止。真空干燥操作需在孢子接入后48h内完成,以免孢子发芽。制备好的沙土管石蜡封口,在低温下可保藏2~10年。

食用菌装袋机

此外,还有甘油保藏法、枝条保藏法、超低温液氮保藏法、冷冻真空干燥法等。

菌种保藏方法虽多,但都存在一些缺点,需进一步进行研究和探讨。其中低温定期移植保藏法虽然简单易行,不需特殊设备,但需几个月转管1次,转管的次数多了,变异的可能性就增大,易造成菌种衰退。近年来人们找到了一种目前认为最有效广谱安全的保藏方法——超低温液氮保藏法,在ATCC 用这种方法保藏双孢蘑菇,9年后菌种仍保持稳定,用于生产,产量、质量无大变化,是目前国际上公认为较为理想的菌种保藏方法,但用这种方法保藏菌种,需要液氨保藏罐设备,且液氯来源有限,费用高,所以还不能普及推广使用,只有少数科研院所使用。此外,还有冷冻真空干燥法,此法一般可保存10年以上,但成本较高。各菌种保藏中心、科研单位和生产单位可根据本地具体条件与生产实际选用菌种保藏方法,以确保菌种无退化或变异,保证科研、生产的正常进行。 

菌种保藏效果的鉴定 

食用菌菌种保藏效果的鉴定的常用指标是菌株的存活率和接种物成活率。我们认为要确切地判断一个菌株在保藏后是否已发生了变异,仅测菌株的这2项指标是不够的,还必须对其进行全面仔细的连续观察和测定,可从以下4个方面进行考查:①生物学特征,如菌丝形态、颜色等;②对基质分解能力,如走菌、吃料速度等;③遗传特征,如相关酶的酶谱、酶活力等;④生产出菇能力,包括产量、质量。通过经常检验,以确保不出现任何退化迹象的菌株取得菇农的信赖。再者,就菌种保藏本身而言,通过保藏菌种的效果鉴定,可以对保藏方法进行评价,进一步加以改善,使保藏体系更加完善。 


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